Que grado de solvente necesito para HPLC?
Guia completa de seleccion de solventes por tecnica analitica, normativa aplicable y recomendaciones de pureza para laboratorios en Mexico.
Para HPLC en fase reversa, se requieren solventes con pureza ≥99.9%, absorbancia UV ≤0.01 a 190nm, contenido de agua ≤0.02% y residuo de evaporacion ≤1 ppm. Los solventes Cromasol de Tecsiquim cumplen con estas especificaciones y estan disponibles para acetonitrilo, metanol, agua, isopropanol, hexano y otros solventes de uso comun en laboratorios analiticos de Mexico.
Que especificaciones debe cumplir un solvente grado HPLC?
Un solvente grado HPLC debe cumplir requisitos mas estrictos que un solvente grado reactivo. Las especificaciones criticas son: pureza minima de 99.9% determinada por cromatografia de gases, absorbancia UV menor o igual a 0.01 unidades de absorbancia a 190 nm (la longitud de onda mas exigente), contenido de agua por Karl Fischer menor o igual a 0.02%, y residuo de evaporacion menor o igual a 1 ppm. Estas especificaciones garantizan lineas base estables, picos bien resueltos y ausencia de interferencias cromatograficas. La farmacopea de Estados Unidos (USP) y la norma ASTM E2192 establecen los criterios de aceptacion para solventes de uso cromatografico.
Cual es el solvente mas usado en HPLC de fase reversa?
El acetonitrilo (CH3CN, CAS 75-05-8) es el solvente organico mas utilizado en HPLC de fase reversa. Se prefiere sobre el metanol porque genera menor presion en la columna, tiene menor viscosidad cuando se mezcla con agua, y ofrece mejor selectividad para la mayoria de analitos farmaceuticos. El metanol (CH3OH, CAS 67-56-1) es la segunda opcion y se utiliza cuando se requiere diferente selectividad o cuando el costo es un factor determinante. El agua grado HPLC se usa como fase acuosa y debe tener resistividad mayor a 18.2 MΩ·cm. En Mexico, los solventes Cromasol de Tecsiquim ofrecen acetonitrilo, metanol y agua grado HPLC con certificado de analisis (CoA) por lote.
Como seleccionar solventes segun la tecnica analitica?
La seleccion del solvente depende directamente de la tecnica analitica:
| Tecnica | Grado requerido | Parametro critico | Solventes comunes |
|---|---|---|---|
| HPLC fase reversa | HPLC / Gradient grade | Absorbancia UV ≤0.01 a 190nm | Acetonitrilo, metanol, agua |
| HPLC fase normal | HPLC | Residuo de evaporacion ≤1 ppm | Hexano, diclorometano, acetato de etilo |
| GC (cromatografia de gases) | GC / Pesticidas | Pureza ≥99.9%, sin interferencias GC | Hexano, acetona, diclorometano |
| Espectrofotometria UV-Vis | HPLC o Espectro | Absorbancia UV a longitud de onda de trabajo | Metanol, etanol, agua |
| Analisis de pesticidas | Pesticidas | Residuo ≤1 ppm, sin picos interferentes | Hexano, acetona, acetato de etilo |
Que pasa si uso un solvente de menor grado en HPLC?
Usar un solvente de grado inferior al requerido (por ejemplo, grado reactivo en lugar de grado HPLC) genera problemas analiticos concretos: lineas base ruidosas o con deriva, picos fantasma que pueden confundirse con analitos, obstruccion prematura de columnas cromatograficas por particulas o residuos, y resultados fuera de especificacion en validaciones de metodo. En laboratorios regulados (farmaceuticos, ambientales, de alimentos), el uso de solventes fuera de especificacion puede invalidar corridas analiticas completas y generar observaciones en auditorias de COFEPRIS o entidades equivalentes.
Que solventes HPLC estan disponibles en Mexico?
En Mexico, los principales proveedores de solventes grado HPLC son Tecsiquim (marca Cromasol), J.T. Baker (ahora Avantor), Merck (marca LiChrosolv) y Honeywell (marca Burdick & Jackson). La linea Cromasol de Tecsiquim incluye acetonitrilo, metanol, agua, isopropanol, tetrahidrofurano, hexano, diclorometano, acido fosforico y acetato de amonio, todos con certificado de analisis por lote.
Como almacenar correctamente solventes HPLC?
El almacenamiento correcto de solventes HPLC es esencial para mantener su pureza. Se deben guardar en su envase original bien cerrado, en un area ventilada, lejos de la luz solar directa y fuentes de calor. La temperatura ideal es entre 15 y 25°C. Una vez abierto el envase, se recomienda usar el solvente en un plazo maximo de 6 meses. Los solventes abiertos deben protegerse de la humedad ambiental, especialmente el acetonitrilo que es higroscopico. Para preparar fases moviles, se recomienda filtrar los solventes a traves de membranas de 0.22 o 0.45 micrometros y desgasificar antes de usar.